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Thèses et Mémoire de l'Université de Strasbourg

Manipulations microfluidiques de gouttelettes pour l'évolution dirigée des protéines

MAZUTIS, Linas (2009) Manipulations microfluidiques de gouttelettes pour l'évolution dirigée des protéines. Thèses de doctorat, Université de Strasbourg.

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Résumé

La compartimentalisation de la "soupe primordiale" dans des vésicules est considérée comme l'un des principaux facteurs ayant permis l'émergence de la vie. Ces gouttelettes de quelques micromètres créent un lien entre génotype et phénotype, et grâce à la division, un mécanisme pour l’hérédité et l’évolution, qui a conduit à l'émergence des cellules actuelles. De tels microcompartiments, peuvent être créés au laboratoire sous la forme d’une émulsion composée de millions de gouttelettes contenant des gènes et tous les ingrédients nécessaires pour leur expression in vitro. Ces émulsions miment ainsi des populations de cellules artificielles qui peuvent être sélectionnées pour un phénotype donné sous des conditions strictement contrôlées non réalisables dans des systèmes in vivo. Cette thèse de doctorat présente le développement de systèmes microfluidiques pour l’évolution dirigée. Les résultats obtenus montrent qu’il est possible de produire des gouttelettes hautement monodisperses pouvant être manipulées de manière précise et contrôlable, ce qui était jusqu’à présent impossible pour des émulsions réalisées par des méthodes classiques. En utilisant un ensemble de nouveaux dispositifs microfluidiques et une composition adéquate d’huile porteuse, des gènes uniques ont été amplifiés et leur expression in vitro mesurée en microgouttelettes. Ces dispositifs ont ensuite été utilisés pour réaliser et analyser des réactions biologiques complexes et multi-étapes. Une technique originale de fusion passive de paires de gouttelettes a également été développée. Ces travaux constituent les premiers pas vers la création de plate-formes microfluidiques intégrées et totalement in vitro.

Type d'EPrint:Thèse de doctorat
Sujets:CL Classification > DDC Dewey Decimal Classification > 600 Technologie (sciences appliquées) > 660 Génie chimique, technologies alimentaires > 660.2 Génie chimique > 660.29 Chimie physique appliquée
Classification Thèses Unistra > Sciences, technologies > Sciences appliquées > 660 Génie chimique, technologies alimentaires > 660.2 Génie chimique > 660.29 Chimie physique appliquée

CL Classification > DDC Dewey Decimal Classification > 500 Sciences de la nature et mathématiques > 570 Sciences de la vie. Biologie. Biochimie > 572 Biochimie > 572.6 Protéines
Classification Thèses Unistra > Santé > Sciences de la vie, biologie, biochimie > 570 Sciences de la vie. Biologie. Biochimie > 572 Biochimie > 572.6 Protéines

UNERA Classification UNERA > DISC Discipline UNERA > DISC-20 Physique, chimie, matériaux
UNERA Classification UNERA > ACT Domaine d'activité UNERA > ACT-2 Bio-industries, biotechnologies
CL Classification > DDC Dewey Decimal Classification > 600 Technologie (sciences appliquées) > 660 Génie chimique, technologies alimentaires > 660.6 Biotechnologie > 660.63 Génie biochimique
Classification Thèses Unistra > Sciences, technologies > Sciences appliquées > 660 Génie chimique, technologies alimentaires > 660.6 Biotechnologie > 660.63 Génie biochimique
Code ID:1755
Déposé le :05 Mars 2010

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