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Thèses et Mémoire de l'Université de Strasbourg

Approche de thérapie génique anti-cancéreuse combinée à l’irradiation : étude de la réponse de promoteurs aux radiations ionisantes

ANSTETT, Anne (2005) Approche de thérapie génique anti-cancéreuse combinée à l’irradiation : étude de la réponse de promoteurs aux radiations ionisantes. Thèses de doctorat, Université Louis Pasteur.

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Résumé

La thérapie génique est un moyen de traitement du cancer en voie de développement. Cette étude s’intéresse au développement d’un système de thérapie génique induit par les radiations ionisantes (RI) dans le but de radiosensibiliser les cellules tumorales. Un système d’expression basé sur l’utilisation de promoteurs induits par les radiations va permettre l’expression de gènes anti-tumoraux dans le réseau vasculaire tumoral. Le développement des tumeurs solides est dépendant de la formation de vaisseaux sanguins (angiogénèse). En se développant, les cellules tumorales entrent directement en contact avec les cellules endothéliales du réseau vasculaire. Les cellules endothéliales représentent une cible efficace pour l’introduction des vecteurs thérapeutiques du fait de leur stabilité génétique et de leur proximité avec les cellules tumorales, rendant ainsi les molécules anti-tumorales plus efficaces. L’identification de promoteurs induits par les RI endogènes aux cellules endothéliales a été menée suite à une étude des profils d’expression utilisant la technologie des puces à ADN. L’analyse de l’activité des promoteurs en réponses aux RI a été testée dans un plasmide rapporteur. Cette étude a montré que des promoteurs natifs clonés dans des plasmides ne sont pas utilisables en tant que tels en thérapie génique du cancer, limités par leur trop faibles inductions en réponses aux RI. A l’opposé, des promoteurs synthétiques contenant des sites répétés spécifiques pour la fixation de facteurs de transcriptions tels que NF-κB sont de bons candidats en vue d’une utilisation en thérapie génique. L’activité de cinq éléments TGGGGACTTTCCGC répétés dans un système rapporteur luciferase a été augmentée d’une manière dose-dépendente. De plus, la réponse à de faibles doses thérapeutiques fractionnées a été augmentée en comparaison à une même dose unique. Une application du promoteur synthétique de fixation pour NF-κB est envisageable dans le traitement radio-thérapeutique du cancer. Gene therapy is an emerging cancer treatment modality. We are interested in developing a radiation-inducible gene therapy system to sensitize tumor vasculature to the effects of ionizing radiation (IR) treatment. An expression system based on irradiation-inducible promoters will drive the expression of anti-tumor genes in the tumor vasculature. Because blood vessels grow into the tumour, extending a vast network of capillaries throughout (angiogenesis), direct contact between endothelial cells and tumour cells can develop. Strategically, this type of close interaction could benefit the introduction of gene-therapy vectors into the genetic stable vascular endothelial cells from potentially enhancing the effectiveness of anti-tumor molecules. The identification of IR-inducible promoters native to endothelial cells was performed by gene expression profiles using cDNA microarray technology. Analysis of the activity of the promoters in response to IR was assessed in a reporter plasmid. We found that authentic promoters cloned onto a plasmid are not suitable for cancer gene therapy due to their low induction upon IR. In contrast, synthetic promoters containing repeated sequence-specific binding sites for IR-activated transcription factors such as NF-κB are substantial good potential candidates for gene therapy. The activity of five tandemly repeated TGGGGACTTTCCGC elements for NF-κB binding in a luciferase reporter was increased in a dose-dependent manner. Interestingly, the response to fractionated therapeutically low doses was improved in comparison to the total single dose. Thus, we put present evidence that a synthetic promoter for NF-κB specific binding may have application in the radio-therapeutic treatment of the cancer.

Type d'EPrint:Thèse de doctorat
Sujets:CL Classification > DDC Dewey Decimal Classification > 500 Sciences de la nature et mathématiques > 570 Sciences de la vie. Biologie. Biochimie > 571 Physiologie et sujets voisins > 571.6 Biologie cellulaire
Classification Thèses Unistra > Santé > Sciences de la vie, biologie, biochimie > 570 Sciences de la vie. Biologie. Biochimie > 571 Physiologie et sujets voisins > 571.6 Biologie cellulaire

UNERA Classification UNERA > ACT Domaine d'activité UNERA > ACT-5 Santé, industrie du médicament, cosmétique
UNERA Classification UNERA > DISC Discipline UNERA > DISC-16 Sciences de la vie et de la santé, psychologie
Code ID:985
Déposé le :09 Novembre 2005

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